印度疫情急劇惡化，隨著時(shí)間的推移，每日新增新冠病例數(shù)不斷創(chuàng)下新高。然而更可怕的是，數(shù)字背后的真實(shí)感染人數(shù)遠(yuǎn)超想象。

印度媒體報(bào)道，隨著新冠測試需求的不斷增加，一個(gè)新的情況出現(xiàn)了——高達(dá)20%的有癥狀患者的RT-PCR檢測結(jié)果是陰性。

這種假陰性現(xiàn)象的出現(xiàn)，不僅意味著大批已經(jīng)感染新冠病毒的患者，因?yàn)闄z測試劑的結(jié)果而被醫(yī)院拒之門外；更重要的是隨著這些患者四處走動(dòng)，病毒也正在傳播向更多的地方。

什么是RT-PCR檢測法？

RT-PCR檢測被認(rèn)為是診斷新冠病毒的黃金標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)此前的券商研報(bào)介紹：

PCR核酸檢測法的基本原理是根據(jù)已知基因序列信息，設(shè)計(jì)多對特異引物，運(yùn)用DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增技術(shù)，對處理后的樣本進(jìn)行基因擴(kuò)增，因?yàn)橐锏奶禺愋?，如果樣本存在目?biāo)病原體，則會擴(kuò)增出相應(yīng)的目標(biāo)基因片段，由此判斷是否陽性。

只要知道目標(biāo)基因序列，設(shè)計(jì)多對引物，就可以套用已有技術(shù)平臺，進(jìn)行檢測試劑盒開發(fā)，所以核酸法研發(fā)最快。

新冠病毒是RNA病毒，所以在PCR之前還需加上反轉(zhuǎn)錄（RT）過程，將RNA反轉(zhuǎn)錄成DNA后，再進(jìn)行PCR。

印度醫(yī)學(xué)研究理事會（ICMR）對RT-PCR檢測要求的最低靈敏度（即檢測陽性的能力）為95%，也就是說會有5%的假陰性結(jié)果。

然而現(xiàn)實(shí)情況是，印度媒體了解到，印度的假陰性結(jié)果的比例正在上升，盡管尚未有數(shù)據(jù)支持。

造成假陰性的原因是什么？

理論上，RT-PCR檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性又四個(gè)因素決定：病人體內(nèi)的病毒載量、檢測樣本收集和處理的質(zhì)量、試劑本身的有效性、以及檢測解釋的標(biāo)準(zhǔn)。

根據(jù)這些因素，有印度媒體總結(jié)了印度假陰性結(jié)果比例如此之高的可能原因。

首先以病毒載量為例，可能跟提取部位有關(guān)。

一些在RT-PCR檢測中呈假陰性結(jié)果的患者隨后在支氣管肺泡灌洗液（BAL）檢測中呈陽性，即樣本是從下呼吸道收集。這讓一些人猜測，某些病毒變種繞過了上呼吸道、以肺部為目標(biāo)，這可能導(dǎo)致基于鼻腔和喉嚨樣本的RT-PCR 檢測失效。

其次，是處理能力不足。數(shù)據(jù)顯示，印度新冠病毒檢測實(shí)驗(yàn)室數(shù)量從2020年2月初的14家，大規(guī)模增加到2021年4月的逾2400家。這不僅需要相關(guān)部門快速批準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室，同時(shí)也需要大批訓(xùn)練有素的技術(shù)人員。

印度媒體稱，ICMR在2020年7月列出了30家質(zhì)控機(jī)構(gòu)對所有獲批的檢測實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢查，隨后又再增加了8家質(zhì)控機(jī)構(gòu)。然而消息顯示，這些質(zhì)控機(jī)構(gòu)只對設(shè)備進(jìn)行了幾次檢查，并沒有隨機(jī)抽取樣本進(jìn)行復(fù)檢。

第三是人為因素。所有的RT-PCR檢測試劑包括了一個(gè)內(nèi)部控制（Internal Control, IC）,以防止沒有RNA提取或擴(kuò)增的情況。這個(gè)IC分外源性和內(nèi)源性，印度市場超過75%的RT-PCR檢測試劑是更便宜的外源性IC。起初ICMR認(rèn)為外源性IC無法反應(yīng)采集樣本的質(zhì)量，但是最后由于廠商抗議這種要求阻礙了公平競爭，而最終修改為外源性和內(nèi)源性都可以。

最后一點(diǎn)當(dāng)然就是大家最關(guān)注的病毒突變了。RT-PCR檢測的是特定一個(gè)或一些病毒基因片段，但是如果突變部位恰好是檢測部位，那么就會出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

見聞此前文章提到，繼此前發(fā)現(xiàn)雙重變異病毒之后，印度多地已經(jīng)出現(xiàn)三重變異病毒（triple-mutant variant，也稱雙突變變異病毒），即三種不同的新冠病毒毒株結(jié)合形成一個(gè)新的變種。這種新變種毒株比其他舊毒株具有更強(qiáng)傳播力，為抗擊疫情雪上加霜。

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